Παραγωγή μελανίνης από μαύρες ζύμες

Η μελανίνη είναι μια από τις πιο σημαντικές φυσικές χρωστικές που παράγονται από διάφορους οργανισμούς, από μικρόβια μέχρι φυτά και θηλαστικά. Οι μελανίνες διαθέτουν εξαιρετικές ιδιότητες όπως ραδιοπροστατευτική και αντιοξειδωτική δράση, χηλοποίηση βαρέων μετάλλων και απορρόφηση οργανικών ενώσεων. Η...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Main Author: Τόλια, Ειρήνη
Other Authors: Σαρρής, Δημήτριος
Language:el_GR
Published: 2024
Subjects:
Online Access:http://hdl.handle.net/11610/26095
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
_version_ 1828462387680772096
author Τόλια, Ειρήνη
author2 Σαρρής, Δημήτριος
author_facet Σαρρής, Δημήτριος
Τόλια, Ειρήνη
author_sort Τόλια, Ειρήνη
collection DSpace
description Η μελανίνη είναι μια από τις πιο σημαντικές φυσικές χρωστικές που παράγονται από διάφορους οργανισμούς, από μικρόβια μέχρι φυτά και θηλαστικά. Οι μελανίνες διαθέτουν εξαιρετικές ιδιότητες όπως ραδιοπροστατευτική και αντιοξειδωτική δράση, χηλοποίηση βαρέων μετάλλων και απορρόφηση οργανικών ενώσεων. Η βιοσύνθεση της μελανίνης μέσω της μεταβολικής οδού DOPA και/ή της οδού DHN περιλαμβάνει κυρίως τα ένζυμα τυροσινάση και λακκάση που καταλύουν την οξείδωση των φαινολικών και ινδολικών υποστρωμάτων για να σχηματίσουν κατηγορίες μελανίνης, δηλαδή ευμελανίνη, φαιομελανίνη, αλλομελανίνες και πυομελανίνη. Η οικονομικά αποδοτική παραγωγή μελανίνης σε μεγάλη κλίμακα, με χημικά καθορισμένη σύνθεση, αποτελεί μια σημαντική τεχνική πρόκληση. Η στρατηγική αξιοποίησης χαμηλού κόστους και άφθονων ροών αγροτοβιομηχανικών αποβλήτων και υποπροϊόντων για την παραγωγή της μικροβιακής μελανίνης συνάδει με τις έννοιες της βιώσιμης ανάπτυξης και της κυκλικής οικονομίας, εξαλείφοντας έτσι το περιβαλλοντικό αποτύπωμα. Στην παρούσα εργασία αξιολογήθηκε η δυνατότητα παραγωγής μελανίνης μέσω ζύμωσης χρησιμοποιώντας ως θρεπτικό υπόστρωμα διάφορες εμπορικές πηγές άνθρακα (γλυκόζη, φρουκτόζη, γαλακτόζη, γλυκερόλη μαλτόζη), καθώς και εκχύλισμα από υπολείμματα φλούδας πορτοκαλιού τα οποία αποτελούν απόβλητα της βιομηχανίας τροφίμων. Σε πρώτο στάδιο, πραγματοποιήθηκαν ασυνεχείς ζυμώσεις υγρής καλλιέργειας με το στέλεχος Exophiala phaeomuriformis EXF- 6108. Οι ασυνεχείς ζυμώσεις πραγματοποιήθηκαν σε ανακινούμενες κωνικές φιάλες. Η φρουκτόζη και η γλυκερόλη έδειξαν τα καλύτερα αποτελέσματα όσον αφορά την παραγωγή εξωκυτταρικής μελανίνης με αντίστοιχες τιμές 448,7 mg/L και 461,4 mg/L ενώ η χρήση της γλυκόζης έδωσε επίσης ικανοποιητικά αποτελέσματα. Στην περίπτωση που εξετάστηκε η παραγωγή της ενδοκυτταρικής μελανίνης, η γλυκόζη ήταν το πιο αποδοτικό υπόστρωμα (190,4 mg/L), ακολουθούμενο από την γλυκερόλη και την φρουκτόζη. Η κατανάλωση της πηγής άνθρακα στις προαναφερθέντες περιπτώσεις προσδιορίστηκε πάνω από 95% ενώ ικανοποιητική ήταν και η κατανάλωση αζώτου ελεύθερων αμινοομάδων (54-70,0%). Η μαλτόζη ήταν η πιο αποδοτική πηγή άνθρακα ως προς την παραγωγή εξωπολυσακχαριτών (6,1 g/L) ενώ όταν το θρεπτικό υπόστρωμα της ζύμωσης ήταν γλυκόζη, φρουκτόζη και γλυκερόλη η παραγωγή εξωπολυσακχαριτών κυμάνθηκε μεταξύ 4,0-4,9 g/L. Εν συνεχεία πραγματοποιήθηκαν πειράματα με την χρήσης εκχυλίσματος από υπολείμματα φλούδας πορτοκαλιού ως πηγή άνθρακα, για την παραγωγή μελανίνης σε κωνικές φιάλες καθώς επίσης και σε βιοαντιδραστήρα. Η μέγιστη συγκέντρωση εξωκυτταρικής μελανίνης που επιτεύχθηκε στις κωνικές φιάλες ανήλθε σε 1067 mg/L ενώ η μέγιστη συγκέντρωση της ενδοκυτταρικής μελανίνης ήταν 385,6 mg/L μετά από 120 και 144 ώρες ζύμωσης αντίστοιχα. Στην περίπτωση που η ζύμωση πραγματοποιήθηκε σε βιοαντιδραστήρα η μέγιστη συγκέντρωση εξωκυτταρικής μελανίνης ήταν 1221,2 mg/L ενώ η μέγιστη συγκέντρωση της ενδοκυτταρικής μελανίνης ήταν 123,5 mg/L μετά από 192 ώρες ζύμωσης. H παραγωγή εξωπολυσακχαριτών (5,9 g/L) ευνοήθηκε στα πειράματα που έλαβαν χώρα σε βιοαντιδραστήρα συγκριτικά με τις κωνικές φιάλες (2,2 g/L). Σε τελικό στάδιο, η εξωκυτταρική μελανίνης ανακτήθηκε μέσω δύο διαφορετικών μεθόδων. Η μία μέθοδος αποτελεί την υδρόλυση με τη χρήση HCl για την αποδέσμευση της μελανίνης από τους εξωπολυσακχαρίτες, ενώ η δεύτερη στρατηγική περιλαμβάνει την διαλυτοποίηση της μελανίνης με χρήση ΝαΟΗ και την κατακρήμνιση της με την εφαρμογή όξινων συνθηκών. Τα δείγματα χαρακτηρίστηκαν ως προς τη την απορρόφηση και εκπομπή υπερύθρου φάσματος (FT-IR) και το μέγεθος των σωματιδίων (δυναμική σκέδαση φωτός-DLS). Τα φάσματα FT-IR των δειγμάτων μελανίνης υπέδειξαν την παρουσία χαρακτηριστικών ζωνών μελανίνης αλλά και εξωπολυσακχαριτών σε πολύ μικρή ένταση. Όλοι οι τύποι των μελανινών που εξετάστηκαν έδειξαν υδροδυναμική ακτίνα μεταξύ 76-285,3 nm, ενώ το δείγμα των εξωπολυσακχαριτών έδειξε πολυδιασπορά (88,8 nm και 1070,5 nm). Απαραίτητη κρίνεται η περαιτέρω μελέτη βελτιστοποίησης των ζυμώσεων προς παραγωγή μικροβιακής μελανίνης με σκοπό την αύξηση της παραγωγικότητας του πολυμερούς. Επιπλέον, μελλοντική έρευνα θα επικεντρωθεί στη μελέτη διαφορετικών συνθηκών απομόνωσης της μελανίνης με τη χρήση διαφορετικών μεθοδολογιών με στόχευση σε συγκεκριμένες εφαρμογές.
id oai:hellanicus.lib.aegean.gr:11610-26095
institution Hellanicus
language el_GR
publishDate 2024
record_format dspace
spelling oai:hellanicus.lib.aegean.gr:11610-260952024-02-15T21:15:08Z Παραγωγή μελανίνης από μαύρες ζύμες Τόλια, Ειρήνη Σαρρής, Δημήτριος μελαμίνη αγροβιομηχανικά απόβλητα μικροβιακή ζύμωση βιοαντιδραστήρας φυσικοχημικές ιδιότητες melamin agro-industrial waste microbial fementation bioreactor physicochemical properties Melanins Industries--Waste disposal Fermentation Bioreactors Η μελανίνη είναι μια από τις πιο σημαντικές φυσικές χρωστικές που παράγονται από διάφορους οργανισμούς, από μικρόβια μέχρι φυτά και θηλαστικά. Οι μελανίνες διαθέτουν εξαιρετικές ιδιότητες όπως ραδιοπροστατευτική και αντιοξειδωτική δράση, χηλοποίηση βαρέων μετάλλων και απορρόφηση οργανικών ενώσεων. Η βιοσύνθεση της μελανίνης μέσω της μεταβολικής οδού DOPA και/ή της οδού DHN περιλαμβάνει κυρίως τα ένζυμα τυροσινάση και λακκάση που καταλύουν την οξείδωση των φαινολικών και ινδολικών υποστρωμάτων για να σχηματίσουν κατηγορίες μελανίνης, δηλαδή ευμελανίνη, φαιομελανίνη, αλλομελανίνες και πυομελανίνη. Η οικονομικά αποδοτική παραγωγή μελανίνης σε μεγάλη κλίμακα, με χημικά καθορισμένη σύνθεση, αποτελεί μια σημαντική τεχνική πρόκληση. Η στρατηγική αξιοποίησης χαμηλού κόστους και άφθονων ροών αγροτοβιομηχανικών αποβλήτων και υποπροϊόντων για την παραγωγή της μικροβιακής μελανίνης συνάδει με τις έννοιες της βιώσιμης ανάπτυξης και της κυκλικής οικονομίας, εξαλείφοντας έτσι το περιβαλλοντικό αποτύπωμα. Στην παρούσα εργασία αξιολογήθηκε η δυνατότητα παραγωγής μελανίνης μέσω ζύμωσης χρησιμοποιώντας ως θρεπτικό υπόστρωμα διάφορες εμπορικές πηγές άνθρακα (γλυκόζη, φρουκτόζη, γαλακτόζη, γλυκερόλη μαλτόζη), καθώς και εκχύλισμα από υπολείμματα φλούδας πορτοκαλιού τα οποία αποτελούν απόβλητα της βιομηχανίας τροφίμων. Σε πρώτο στάδιο, πραγματοποιήθηκαν ασυνεχείς ζυμώσεις υγρής καλλιέργειας με το στέλεχος Exophiala phaeomuriformis EXF- 6108. Οι ασυνεχείς ζυμώσεις πραγματοποιήθηκαν σε ανακινούμενες κωνικές φιάλες. Η φρουκτόζη και η γλυκερόλη έδειξαν τα καλύτερα αποτελέσματα όσον αφορά την παραγωγή εξωκυτταρικής μελανίνης με αντίστοιχες τιμές 448,7 mg/L και 461,4 mg/L ενώ η χρήση της γλυκόζης έδωσε επίσης ικανοποιητικά αποτελέσματα. Στην περίπτωση που εξετάστηκε η παραγωγή της ενδοκυτταρικής μελανίνης, η γλυκόζη ήταν το πιο αποδοτικό υπόστρωμα (190,4 mg/L), ακολουθούμενο από την γλυκερόλη και την φρουκτόζη. Η κατανάλωση της πηγής άνθρακα στις προαναφερθέντες περιπτώσεις προσδιορίστηκε πάνω από 95% ενώ ικανοποιητική ήταν και η κατανάλωση αζώτου ελεύθερων αμινοομάδων (54-70,0%). Η μαλτόζη ήταν η πιο αποδοτική πηγή άνθρακα ως προς την παραγωγή εξωπολυσακχαριτών (6,1 g/L) ενώ όταν το θρεπτικό υπόστρωμα της ζύμωσης ήταν γλυκόζη, φρουκτόζη και γλυκερόλη η παραγωγή εξωπολυσακχαριτών κυμάνθηκε μεταξύ 4,0-4,9 g/L. Εν συνεχεία πραγματοποιήθηκαν πειράματα με την χρήσης εκχυλίσματος από υπολείμματα φλούδας πορτοκαλιού ως πηγή άνθρακα, για την παραγωγή μελανίνης σε κωνικές φιάλες καθώς επίσης και σε βιοαντιδραστήρα. Η μέγιστη συγκέντρωση εξωκυτταρικής μελανίνης που επιτεύχθηκε στις κωνικές φιάλες ανήλθε σε 1067 mg/L ενώ η μέγιστη συγκέντρωση της ενδοκυτταρικής μελανίνης ήταν 385,6 mg/L μετά από 120 και 144 ώρες ζύμωσης αντίστοιχα. Στην περίπτωση που η ζύμωση πραγματοποιήθηκε σε βιοαντιδραστήρα η μέγιστη συγκέντρωση εξωκυτταρικής μελανίνης ήταν 1221,2 mg/L ενώ η μέγιστη συγκέντρωση της ενδοκυτταρικής μελανίνης ήταν 123,5 mg/L μετά από 192 ώρες ζύμωσης. H παραγωγή εξωπολυσακχαριτών (5,9 g/L) ευνοήθηκε στα πειράματα που έλαβαν χώρα σε βιοαντιδραστήρα συγκριτικά με τις κωνικές φιάλες (2,2 g/L). Σε τελικό στάδιο, η εξωκυτταρική μελανίνης ανακτήθηκε μέσω δύο διαφορετικών μεθόδων. Η μία μέθοδος αποτελεί την υδρόλυση με τη χρήση HCl για την αποδέσμευση της μελανίνης από τους εξωπολυσακχαρίτες, ενώ η δεύτερη στρατηγική περιλαμβάνει την διαλυτοποίηση της μελανίνης με χρήση ΝαΟΗ και την κατακρήμνιση της με την εφαρμογή όξινων συνθηκών. Τα δείγματα χαρακτηρίστηκαν ως προς τη την απορρόφηση και εκπομπή υπερύθρου φάσματος (FT-IR) και το μέγεθος των σωματιδίων (δυναμική σκέδαση φωτός-DLS). Τα φάσματα FT-IR των δειγμάτων μελανίνης υπέδειξαν την παρουσία χαρακτηριστικών ζωνών μελανίνης αλλά και εξωπολυσακχαριτών σε πολύ μικρή ένταση. Όλοι οι τύποι των μελανινών που εξετάστηκαν έδειξαν υδροδυναμική ακτίνα μεταξύ 76-285,3 nm, ενώ το δείγμα των εξωπολυσακχαριτών έδειξε πολυδιασπορά (88,8 nm και 1070,5 nm). Απαραίτητη κρίνεται η περαιτέρω μελέτη βελτιστοποίησης των ζυμώσεων προς παραγωγή μικροβιακής μελανίνης με σκοπό την αύξηση της παραγωγικότητας του πολυμερούς. Επιπλέον, μελλοντική έρευνα θα επικεντρωθεί στη μελέτη διαφορετικών συνθηκών απομόνωσης της μελανίνης με τη χρήση διαφορετικών μεθοδολογιών με στόχευση σε συγκεκριμένες εφαρμογές. 2024-02-01T13:49:54Z 2024-02-01T13:49:54Z 2023-06 http://hdl.handle.net/11610/26095 el_GR Αναφορά Δημιουργού - Μη Εμπορική Χρήση - Παρόμοια Διανομή 4.0 Διεθνές https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ 76 σ. application/pdf Λήμνος
spellingShingle μελαμίνη
αγροβιομηχανικά απόβλητα
μικροβιακή ζύμωση
βιοαντιδραστήρας
φυσικοχημικές ιδιότητες
melamin
agro-industrial waste
microbial fementation
bioreactor
physicochemical properties
Melanins
Industries--Waste disposal
Fermentation
Bioreactors
Τόλια, Ειρήνη
Παραγωγή μελανίνης από μαύρες ζύμες
title Παραγωγή μελανίνης από μαύρες ζύμες
title_full Παραγωγή μελανίνης από μαύρες ζύμες
title_fullStr Παραγωγή μελανίνης από μαύρες ζύμες
title_full_unstemmed Παραγωγή μελανίνης από μαύρες ζύμες
title_short Παραγωγή μελανίνης από μαύρες ζύμες
title_sort παραγωγή μελανίνης από μαύρες ζύμες
topic μελαμίνη
αγροβιομηχανικά απόβλητα
μικροβιακή ζύμωση
βιοαντιδραστήρας
φυσικοχημικές ιδιότητες
melamin
agro-industrial waste
microbial fementation
bioreactor
physicochemical properties
Melanins
Industries--Waste disposal
Fermentation
Bioreactors
url http://hdl.handle.net/11610/26095
work_keys_str_mv AT toliaeirēnē paragōgēmelaninēsapomaureszymes