Academic Journal
Способ получения чистых Fc-фрагментов иммуноглобулина g крысы
| Τίτλος: | Способ получения чистых Fc-фрагментов иммуноглобулина g крысы |
|---|---|
| Πηγή: | Вестник Удмуртского университета. Серия «Биология. Науки о Земле». |
| Στοιχεία εκδότη: | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Удмуртский государственный университет», 2012. |
| Έτος έκδοσης: | 2012 |
| Θεματικοί όροι: | FC-ФРАГМЕНТЫ КРЫС, СПОСОБ ОЧИСТКИ, ИММУНОГЛОБУЛИН G КРЫС, ПРОТЕИН G, ИОНООБМЕННАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ, 3. Good health |
| Περιγραφή: | Previously, we devised a vaccine for treating patients suffering from rheumatoid arthritis, the active principle of said vaccine was Fc fragments of homologous IgG. We showed the efficiency of said vaccine in the suppression of collagen-directed autoimmune reactions and in the reduction of the arthritis symptoms in the model of collagen-induced arthritis in rats. We discovered that the efficiency of said vaccine depended on the purity of Fc fragments of IgG, which is on the absence of Fab-fragment impurities levelling the effects of the suppression of collagen-directed autoimmune reactions caused by Fc fragments. The intention of the work was to develop methods of effective purification for rat IgG Fc fragments from Fab-fragment impurities. To this effect the comparative analysis on the efficiency between the methods of cation-exchange, anion-exchange and affine chromatographies using protein-G-sepharose was carried out for the purpose to obtain pure rat IgG Fc fragments. Rat IgG Fc fragments obtained by the method of papain proteolysis have been absorbed on both DEAE-cellulose and CM-cellulose. Rat IgG Fc fragments are heterogenous. One part of them interact neither with DEAE-cellulose nor with CM-cellulose, the other part is absorbed both on DEAE-cellulose and on CM-cellulose, The application of ionic strength gradient at ion-exchange chromatography allows to change the ratio of rat IgG Fc/Fab fragments in the samples eluated from the sorbate but we have failed to completely separate Fc and Fab fragments and obtain pure Fc fragments freed from Fab-fragment impurities. We have discovered that rat IgG Fc fragments obtained by the method of papain hydrolysis do not interact with protein G as opposed to Fab fragments which combine with it. Affine chromatography using protein G sepharose is an effective method for the separation of papain Fcand Fab fragments and obtaining of pure rat IgG Fc fragments. Ранее нами была разработана вакцина для лечения ревматоидного артрита человека, содержащая в качестве действующего начала Fc-фрагменты гомологичного IgG. Мы показали ее эффективность в подавлении аутоиммунных реакций против коллагена и редукции симптомов артрита в модели коллаген-индуцированного артрита крыс. Было обнаружено, что эффективность вакцины зависит от чистоты Fc-фрагментов IgG, отсутствия примесей Fab-фрагментов, которые нивелируют эффекты подавления аутоиммунных реакций в модели коллаген-индуцированного крыс, вызываемые Fc-фрагментами. Целью работы явилась разработка методов эффективной очистки Fc-фрагментов IgG крыс от примесей Fab-фрагментов. Для этого был проведен сравнительный анализ эффективности методов катионообменной, анионообменной и аффинной хроматографии на протеин G сефарозе для получения чистых Fc-фрагментов IgG крыс. Fc-фрагменты IgG крыс, полученные методом папаинового протеолиза, сорбируются как на ДЭАЭ-, так и на КМ-целлюлозе. Fab-фрагменты IgG крыс – гетерогенны, часть из них не взаимодействует ни с КМ-целлюлозой, ни ДЭАЭ-целлюлозой, другая часть сорбируется как на КМ-, так и ДЭАЭ – целлюлозе. Использование градиента ионной силы при ионообменной хроматографии позволяет изменить соотношение Fc-и Fab-фрагментов IgG крыс в образцах, элюируемых с сорбента, но добиться полного разделения Fabи Fc-фрагментов и получить чистые Fc-фрагменты, свободные от примесей Fab-фрагментов не удается. Обнаружено, что Fc-фрагменты IgG крыс, полученные методом папаинового гидролиза, не взаимодействуют с протеином G, тогда как Fab-фрагменты связываются с ним. Аффинная хроматография на протеин G-сефарозе является эффективным методом разделения папаиновых Fcи Fab-фрагментов IgG крыс и получения чистых Fc-фрагментов IgG крыс. |
| Τύπος εγγράφου: | Article |
| Περιγραφή αρχείου: | text/html |
| Γλώσσα: | Russian |
| ISSN: | 2413-2489 2412-9518 |
| Σύνδεσμος πρόσβασης: | http://cyberleninka.ru/article_covers/14743064.png http://cyberleninka.ru/article/n/sposob-polucheniya-chistyh-fc-fragmentov-immunoglobulina-g-krysy |
| Αριθμός Καταχώρησης: | edsair.od......2806..30efb20bf61d81560db0b59202bac51a |
| Βάση Δεδομένων: | OpenAIRE |
| ISSN: | 24132489 24129518 |
|---|