Εκτίμηση εντερικής διαπερατότητας φλαβονοειδών αναλόγων με την χρήση βιομιμητικής χρωματογραφίας ακινητοποιημένων τεχνητών μεμβράνων : πτυχιακή εργασία
Τα τελευταιά χρόνια υπάρχει διαρκώς αυξανόμενο ενδιαφέρον όσον αφορά την έρευνα των φλαβονοειδών λόγω των ποικίλων ευεργετικών τους δράσεων στον άνθρωπο. Τα φλαβονοειδή αποτελούνται από μια μεγάλη ομάδα πολυφαινολικών ενώσεων με χημική δομή γ-βενζοπυρένιου και εντοπίζονται σε μεγάλες ποσότητες στους...
Αποθηκεύτηκε σε:
| Κύριοι συγγραφείς: | , |
|---|---|
| Συγγραφή απο Οργανισμό/Αρχή: | |
| Μορφή: | Thesis Βιβλίο |
| Γλώσσα: | Greek |
| Δημοσίευση: |
2016.
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | http://hdl.handle.net/11610/17186 |
| Ετικέτες: |
Προσθήκη ετικέτας
Δεν υπάρχουν, Καταχωρήστε ετικέτα πρώτοι!
|
| Περίληψη: | Τα τελευταιά χρόνια υπάρχει διαρκώς αυξανόμενο ενδιαφέρον όσον αφορά την έρευνα των φλαβονοειδών λόγω των ποικίλων ευεργετικών τους δράσεων στον άνθρωπο. Τα φλαβονοειδή αποτελούνται από μια μεγάλη ομάδα πολυφαινολικών ενώσεων με χημική δομή γ-βενζοπυρένιου και εντοπίζονται σε μεγάλες ποσότητες στους φυτικούς οργανισμούς και κυρίως στα φούτα και στα λαχανικά, προάγοντας την αναστολή του οξειδωτικού στρες και δρώντας ως αυξητικοί παράγοντες. Πολλά φλαβονοειδή έχουν διαπιστωθεί ότι παρουσιάζουν αντιοξειδωτική δράση, ικανότητα δέσμευσης ελεύθερων ριζών, ηπατοπροστατευτική και αντιφλεγμονώδη δράση και αντικαρκινικές ιδιότητες. Η κατάταξή τους εξαρτάται από τη χημική δομή τους, τον βαθμό υδροξυλίωσής τους, την παρουσία άλλων υποκαταστατών και παραγόντων σύζευξης και το βαθμό πολυμερισμού τους. Η απορρόφηση των φλαβονειδών αναλόγων διαμέσου του λεπτού εντέρου θεωρείται ότι αποτελεί την πλέον κρίσιμη παράμετρο για την εκδήλωση της βιολογικής τους δράσης. Σκοπός: Στην παρούσα μελέτη προσδιορίστηκαν οι χρωματογραφικοί δείκτες φωσφολιποφιλίας 41 φλαβονοειδών, οι οποίοι αξιοποιήθηκαν περαιτέρω για την εκτίμηση της εντερικής διαπερατότητάς τους λαμβάνοντας υπόψη και πρόσθετες φυσικοχημικές ιδιότητες που μπορούν να προσδιοριστούν από λογισμικά προγράμματα. Υλικά και Μέθοδοι: Για τον προσδιορισμό του αριθμού δεσμών υδρογόνου ως δότη (HBD) και ως δέκτη (HBA), της συνολικής πολικής επιφάνειας επαφής (TPSA), του συντελεστή μερισμού στο σύστημα οκτανόλης/νερού logP και του μοριακού βάρους (MW) χρησιμοποιήθηκε το πρόγραμμα ADME Boxes v.3.0 (Advanced Pharma Algorithms, Inc., Toronto, Canada). Ο προσδιορισμός των χρωματογραφικών δεικτών logkwΙΑΜ έγινε με τη χρήση στηλών ακινητοποιημένων τεχνητών μεμβρανών (IAM: Immobilized Artificial Membranes). Ως κινητή φάση χρησιμοποιήθηκε ακετονιτρίλιο/ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών σταθερής ιονικής ισχύος (PBS) pH 7,4, όπου η ροή της κινητής φάσης ήταν 1, 1.5, 2 ή 3ml/min ανάλογα με τον χρόνο έκλουσης των φλαβονοειδών. Ως στατικές φάσεις χρησιμοποιήθηκαν οι ακόλουθες στήλες: Στήλη IAM.PC.DD.2 10μm (30x4,6 mm i.d.), Regis Technology όπου το υλικό πληρώσεως της στήλης είναι πήγμα οξειδίου του πυριτίου-προπυλαμίνης σιλανοποιημένο με μόρια φωσφατιδυλοχολίνης. Επίσης, χρησιμοποιήθηκε η στήλη IAM.PC.MG 10μm (150x4,6 mm i.d.), Regis Technology, όπου ως υλικό πληρώσεως χρησιμοποιείται glycidol και μεθυλο-γλυκολικό οξύ (MG) το οποίο σχηματίζει χημικώς ουδέτερα αμίδια. Οι μετρήσεις των χρόνων συγκράτησης επαναλήφθηκαν 3 φορές για κάθε δείγμα και μετατράπηκαν στον λογάριθμο του παράγοντα χωρητικότητας σύμφωνα με την εξίσωση: logk = log[( tr - to )/to]. Ως νεκρός χρόνος χρησιμοποιήθηκε ο χρόνος έκλουσης της μεθανόλης. Οι δείκτες logkw που αναφέρονται σε κινητή φάση αποτελούμενη από 100% ρυθμιστικό διάλυμα PBS pH 7,4 προσδιορίστηκαν σύμφωνα με την εξίσωση: logk = -Sφ + logkw , όπου φ είναι το ποσοστό του οργανικού τροποποιητή. Μετέπειτα, ακολούθησε συλλογή από τη διεθνή βιβλιογραφία των τιμών του φαινόμενου συντελεστή διαπερατότητας στην μονοστοιβάδα των κυττάρων αδενοκαρκινώματος παχέος εντέρου Caco-2 (Pcaco). Για τη στατιστική επεξεργασία των αποτελεσμάτων, εφαρμόστηκε γραμμική και πολλαπλή ανάλυση παλινδρόμησης με την χρήση των προγραμμάτων Microsoft Excel και Statmost-Axa 7.0. Αποτελέσματα: Οι χρωματογραφικοί δείκτες logkwIAM στην στήλη ΙΑΜ.DD2 παρουσίασαν μεγαλύτερες τιμές από τους αντίστοιχους δείκτες στην στήλη ΙΑΜ.MG σε όλα τα φλαβονοειδή εκτός από την πουεραρίνη. Το αποτέλεσμα αυτό είναι λογικό δεδομένου ότι η στήλη ΙΑΜ.DD2 είναι πιο υδρόφοβη από την στήλη ΙΑΜ.MG. Γενικά, η στήλη IAM.DD2 υπερτερεί από την στήλη IAM.MG όσον αφορά την εκτίμηση του συντελεστή εντερικής διαπερατότητας Pcaco, δεδομένου ότι οι αντίστοιχες εξισώσεις συνοδεύονται από καλύτερα στατιστικά στοιχεία στην στήλη IAM.DD2. Ως εκ τούτου, τα παρόντα αποτελέσματα προτείνουν ως στήλη πρώτης επιλογής την στήλη IAM.DD2 για την εκτίμηση της εντερικής διαπερατότητας των φλαβονοειδών. Συμπεράσματα: Η βιομιμητική χρωματογραφία ακινητοποιημένων τεχνητών μεμβρανών αποτελεί μια γρήγορη, εύχρηστη και χαμηλού κόστους τεχνική που μπορεί να χρησιμοποιηθεί με αξιοπιστία για την εκτίμηση της εντερικής διαπερατότητας των φλαβονοειδών. Ως στήλη πρώτης επιλογής προτείνεται η στήλη IAM.DD2 για την εκτίμηση της εντερικής διαπερατότητας των φλαβονοειδών, χωρίς ωστόσο να απορρίπτεται η χρήση της στήλης IAM.MG. Επίσης, η φωσφολιποφιλία και η ικανότητα σχηματισμού δεσμών υδρογόνου ως δότης φαίνεται ότι παίζουν καθοριστικό ρόλο στην εντερική διαπερατότητα των φλαβονοειδών. Τα αποτελέσματα της παρούσας μελέτης συμβάλλουν περαιτέρω στην κατανόηση των μηχανισμών απορρόφησης των φλαβονοειδών διαμέσου του εντερικού βλεννογόνου στην κυκλοφορία του αίματος. |
|---|---|
| Περιγραφή τεκμηρίου: | Τριμελής επιτροπή : Γιαγκίνης, Κωνσταντίνος, Τσόπελας Φώτης, Καραντώνης Χαράλαμπος. |
| Φυσική περιγραφή: | 116 σ. : πίν., σχ. ; 30 εκ. |
| Βιβλιογραφία: | Βιβλιογραφία : σ. 94-116. |
| Πρόσβαση: | Διάθεση μόνο των λέξεων κλειδιών - περιλήψεων. |