Academic Journal
Модели миелофиброза (обзор литературы и собственные данные)
| Title: | Модели миелофиброза (обзор литературы и собственные данные) |
|---|---|
| Source: | Клиническая онкогематология. Фундаментальные исследования и клиническая практика. |
| Publisher Information: | Общество с ограниченной ответственностью Издательский дом "Практическая медицина", 2017. |
| Publication Year: | 2017 |
| Subject Terms: | PH-НЕГАТИВНЫЕ ХРОНИЧЕСКИЕ МИЕЛОПРОЛИФЕРАТИВНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ,ПЕРВИЧНЫЙ МИЕЛОФИБРОЗ,JAK2 V617F,ТРАНСГЕННЫЕ ЖИВОТНЫЕ,PH-NEGATIVE CHRONIC MYELOPROLIFERATIVE DISORDERS,PRIMARY MYELOFIBROSIS,TRANSGENIC ANIMALS, 3. Good health |
| Description: | Актуальность и цели. Развитие хронических миелопролиферативных заболеваний проходит длительный латентный период, что затрудняет исследования механизмов патогенеза. Наблюдения из клинической практики зачастую требуют экспериментальной проверки. Механизмы опухолевой трансформации, связанные с мутациями, встречающимися при хронических миелопролиферативных заболеваниях, были подтверждены на моделях трансгенных животных. Биологические модели позволили определить комплексную природу развития миелофиброза. Однако изучение отдельных клеточных механизмов требует создания новых моделей. В работе представлен обзор опубликованных моделей развития миелопролиферативных заболеваний, в основном, первичного миелофиброза и результаты исследования разработанной клеточной линии с экспрессией JAK2 V617F. Цель настоящей работы создание клеточной линии с экспрессией трансформирующей мутации JAK2 V617F в клетках острого моноцитарного лейкоза THP-1. Методы. Основой для создания трансгенной клеточной линии послужила линия клеток моноцитарного лейкоза THP-1, способная дифференцироваться в макрофаги. Мутация V617F была получена методом направленного мутагенеза. Были созданы две трансгенные линии: одна с экспрессией гена JAK2 с мутацией V617F, другая JAK2 дикого типа. Результаты. Обе трансгенные линии характеризовались повышенной экспрессией JAK2 по сравнению с немодифицированными клетками. При рутинном культивировании трансгенные THP-1 сохраняли морфологию моноцитов. После обработки форболовым эфиром THP-1 дифференцировались в макрофаги и прикреплялись к культуральному пластику. Адгезировавшие клетки принимали различную форму. Часть отличалась сферической формой, у других отмечены псевдоподии. Значимых различий по доле жизнеспособных клеток не наблюдалось. Макрофаги с экспрессией мутантного гена JAK2 и JAK2 дикого типа имели тенденцию к уменьшению количества нежизнеспособных клеток при культивировании. Заключение. Полученная клеточная модель может служить объектом для оценки влияния мутации JAK2 V617F на прои антифибротический потенциал макрофагов. Это может прояснить патогенетическую роль макрофагов в развитии миелофибороза. Кроме того, с помощью данной модели можно исследовать новые методы диагностики и терапии как первичного, так и вторичного миелофиброза. Background & Aims. Chronic myeloproliferative disorders typically develop during a long latent period, and it complicates the study of the mechanism of its pathogenesis. Observations from the clinical practice should be confirmed by experiments. The mechanisms of oncological transformation related to mutations associated with chronic myeloproliferative diseases were confirmed in transgene animal models. Biological models permitted to determine a complex nature of myelofibrosis. However, studies of the cellular mechanisms of myelofibrosis require new models. This paper presents a review of published models of myeloproliferative disorders, mainly, primary myelofibrosis, and results of studies of a new cell line with expression of JAK2 V617F. The aim of this study is to create a new cell line with expression of transforming JAK2 V617F mutation in acute monocytic leukemia THP-1 cells. Methods. Transgenic cell lines were created on the basis of monocytic leukemia THP-1 cell line that can differentiate into macrophages. Direct mutagenesis was used to cause V617F mutation. Two cell lines were created: one with JAK2 expression with V617F mutation, the other with wild type JAK2. Results. Both transgenic lines were characterized by increased JAK2 expression as compared to non-modified cells. In routine cultivation, transgenic THP-1 cells retained the morphology of monocytes. After treatment with phorbol ester, THP-1 differentiated into macrophages and become adherent to culture plastic. Adherent cells demonstrated the variety of shapes: some of them were spherical, the other ones had pseudopodia. No significant differences in viability of cells were observed. However, macrophages expressing mutant JAK2 and overexpressing the wild type JAK2 demonstrated a tendency to decreased amount unlivable cells during cultivation. Conclusion. The obtained cell model can be used for estimating the influence of JAK2 V617F mutation on proand antifibrotic potential of macrophages that can help to investigate the pathogenetic role of macrophages in myelofibrosis development. In addition, this model can help to develop novel methods of therapy and diagnostics of primary and secondary myelofibrosis. |
| Document Type: | Article |
| File Description: | text/html |
| Language: | Russian |
| ISSN: | 1997-6933 |
| Access URL: | http://cyberleninka.ru/article/n/modeli-mielofibroza-obzor-literatury-i-sobstvennye-dannye http://cyberleninka.ru/article_covers/17000122.png |
| Accession Number: | edsair.od......2806..3c8dcaada6ec7b94cb13a2e3e3cc91b7 |
| Database: | OpenAIRE |
| ISSN: | 19976933 |
|---|