Academic Journal
Совместное выделение биологически ценных продуктов из пурпурных несерных бактерий
| Title: | Совместное выделение биологически ценных продуктов из пурпурных несерных бактерий |
|---|---|
| Source: | VIII Пущинская конференция «Биохимия, физиология и биосферная роль микроорганизмов». |
| Publisher Information: | Crossref, 2024. |
| Publication Year: | 2024 |
| Subject Terms: | АЦЕТОН-МЕТАНОЛЬНАЯ ЭКСТРАКЦИЯ, ПУРПУРНЫЕ НЕСЕРНЫЕ БАКТЕРИИ, СУПЕРНАТАНТ, БАКТЕРИОХЛОРОФИЛЛ А, ГЕКСАН, УБИХИНОН Q10, КАРОТИНОИДЫ |
| Description: | Пурпурные несерные бактерии являются продуцентами многих биологически значимых соединений, среди которых можно выделить бактериохлорофилл а, каротиноиды и убихинон Q10. Обычно методики их получения направлены на получение одного целевого продукта. На данный момент в литературе нет данных о методике совместного выделения подобных веществ из биомассы пурпурных несерных бактерий в препаративных количествах. Поэтому разработка метода их совместного выделения является актуальной задачей. Целью данной работы было разработать методику совместного получения биологически ценных продуктов из бактериальной биомассы. В качестве объекта исследования использовали биомассу бактерии C. sphaeroides штамм ВКМ В-3534D. Экстракция веществ проводилась тремя способами из целых клеток и клеток, разрушенных с использованием ультразвука. Первым из способов была ацетон-метанольная экстракция. В пробирку с клетками добавляли смесь ацетона и метанола в соотношении 7:2, перемешивали и выдерживали в темноте в течение 5 мин с последующим центрифугированием. Полученный экстракт переводили в гексан для дальнейших стадий. Второй способ заключался в добавлении к клеткам смеси гексан: изопропанол в соотношении 2:1, перемешивали и выдерживали при 50 °С в течение 15 мин, после чего центрифугировали и собирали верхний окрашенный слой. Растворитель упаривали и полученную пленку растворяли в гексане для проведения дальнейших стадий. Третьим способом было добавление к клеткам смеси хлороформ: метанол в соотношении 1:2, с дальнейшим перемешиванием и центрифугированием. Супернатант сливали в другую пробирку. Затем к клеткам добавляли смесь хлороформ: метанол (1:2) с 1% КCl, перемешивали, центрифугировали и добавляли в пробирку с первым супернатантом. Далее добавляли к супернатанту хлороформ и 1% KCl, перемешивали, центрифугировали и собирали нижний окрашенный слой. Растворитель упаривали и полученную пленку растворяли в гексане для проведения дальнейших стадий. Полученные экстракты в гексане наносили на колонку с силикагелем с размером частиц 63-200 мкм. Для разделения использовали смесь гексан:ацетон в соотношении 93:7. На данном этапе отделяли бактериохлорофилл от остальных веществ в экстракте. Последней стадией было разделение каротиноидов и убихинона Q10 с использованием ВЭЖХ в системе ацетонитрил: этанол в соотношении 3:1 без градиента. В процессе выделения веществ не было замечено разницы между использованием целых и разрушенных с помощью ультразвука клеток. Было обнаружено, что при экстракции веществ первым и третьим методами происходило быстрое окисление бактериохлорофилла а. При экстракции вторым методом окисление бактериохлорофилла а не происходило даже в течение 2 месяцев. Таким образом, разрабатываемый подход позволяет получить из биомассы пурпурных несерных бактерий следующие вещества – каротиноиды (сфероиденон), убихинон Q10 и окисленную форму бактериохлорофилла а – бактериофеофитин. |
| Document Type: | Article Conference object |
| Language: | Russian |
| DOI: | 10.34756/geos.2022.17.38412 |
| Accession Number: | edsair.doi...........e90eb094173e23dff77fe84f99bd3eb3 |
| Database: | OpenAIRE |
| DOI: | 10.34756/geos.2022.17.38412 |
|---|