Academic Journal
Определение численности стрептомицетов из разных почв и выделение их в чистую культуру
| Title: | Определение численности стрептомицетов из разных почв и выделение их в чистую культуру |
|---|---|
| Source: | VIII Пущинская конференция «Биохимия, физиология и биосферная роль микроорганизмов». |
| Publisher Information: | Crossref, 2024. |
| Publication Year: | 2024 |
| Subject Terms: | ПРОКАРИОТНЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ, АГАР, СТРЕПТОМИЦЕТЫ, АНТИБИОТИК, РЕЗИСТЕНТНОСТЬ |
| Description: | Стрептомицеты являются самым крупным родом актиномицетов. Их основным местом обитания является почва. Они синтезируют примерно 2400 уникальных соединений различного состава, в частности, большинство антибиотиков, противоопухолевых, противовирусных и антипаразитарных соединений, ферментов, гормонов, витаминов и других веществ. Антибиотики являются незаменимыми в борьбе с бактериальными инфекциями, поэтому стрептомицеты представляют большой интерес для ученых, работающих в области микробиологии, биохимии, биотехнологии [1]. Цель данной работы – определение общей численности прокариотных микроорганизмов и численности стрептомицетов, выделение их в чистую культуру. Для исследования были использованы образцы дерново-почвы 13 и 15. Основные питательные среды, применяемые для культивирования стрептомицетов: казеин-глицериновый агар, овсяный агар [2]. Навески почвенных образцов массой 1 г перед исследованием прогревали при 100 оС в течение 1 часа. Было приготовлено 0,5 л казеин-глицеринового агара, который затем разлили в 24 чашки Петри (12 чашек без добавления антибиотика и 12 чашек с антибиотиком тобромицином). Затем были приготовлены почвенные суспензии образцов почв 13 и 15 путем растирания почвы в ступке с небольшим количеством стерильной воды и переносом почвы в пустую стерильную колбу; после было приготовлено последовательное разведение из этих суспензий до 10-4 каждого образца. Высев на казеин-глицериновый агар производили из разведений 10-3 и 10-4 в трехкратной повторности поверхностным методом по 0,1 мл в каждую чашку Петри и растирали шпателем досуха. Инкубация при 28 оС 5–7 суток. После этого производили подсчет общей численности микроорганизмов и численности стрептомицетов на чашках Петри (табл. 1). Антибиотик подавил рост микроорганизмов на казеин-глицериновом агаре и стрептомицетов обнаружено не было. По полученным данным таблицы видно, что наибольшая общая численность на КГА без антибиотика обнаружена в образце 15-4, а наибольшая общая численность стрептомицетов обнаружена в образце 15-3. Наибольший процент стрептомицетов на КГА без антибиотика обнаружен в образце 13-4, что составляет 30% от общего числа микроорганизмов, выросших на чашках Петри. Для выделения стрептомицетов в чистую культуру их колонии с чашек Петри на казеин-глицериновом агаре пересевали истощающим штрихом секторами на овсяный агар (рис. 1). Для этого чашки Петри с агаризованной средой делили на 4 сектора, затем микробиологической петлей с культурой в первом секторе проводили штрих, прокаляли петлю и делали штрих во втором секторе. Такие же действия проводили для 3 и 4 секторов [3]. Инкубация при 28 оС 5–7 суток. Если не удавалось выделить чистую культуру на каком-то из секторов, то стрептомицеты пересевали на отдельную чашку Петри истощающим штрихом. Далее стрептомицеты с овсяного агара пересевали в пробирки с косым овсяным агаром и инкубировали при 28 оС 5–7 суток. Было пересеяно 24 колонии стрептомицетов. Пробирки с косым агаром были завернуты в пакет, подписаны и помещены в холодильник. Выделенные чистые культуры стрептомицетов могут быть использованы в дальнейших исследованиях. Появление резистентности микроорганизмов к антибиотикам считается глобальной проблемой, в результате появляется разнообразие генов устойчивости к антибиотикам в почвах. Именно поэтому в дальнейшем планируется изучение распространенности антибиотикорезистентности в почвах с разным антропогенным влиянием. |
| Document Type: | Article Conference object |
| Language: | Russian |
| DOI: | 10.34756/geos.2022.17.38261 |
| Accession Number: | edsair.doi...........4f41ba1f68f64de2b637fc03e0d57a2a |
| Database: | OpenAIRE |
| DOI: | 10.34756/geos.2022.17.38261 |
|---|